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聚合酶链式反应(PCR)详细步骤

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浏览:次 2017-05-26 00:16:47

聚合酶链式反应(PCR)详细步骤 聚合酶链式反应(PCR)详细步骤 聚合酶链式反应(PCR)详细步骤1、准备工作1、实验用具与材料:(1)移液枪:200ul、10ul(2)吸头:200ul、20ul(3)吸头台:放置200ul和20ul的吸头1个(4)EP管1.5ml、100ul2、实验用具的处理与准备塑料制品:(包括吸头、EP管等)送至高压3次,实验前将枪头放入吸头台。3、试剂配制和准备:(1) 双蒸水: 100ml盐水瓶内装40ml蒸馏水,送至高压,后分装到几个1。5mlEP管中,⑵0℃中保存备用。(2) PCR中所需要的各种试剂3、PCR时注意事项:佩戴1次性手套,同时避免戴上的1次性的手套接触可疑污染物。4、PCR步骤1、准备100ul EP管2、顺次在管中加入:(50ul反应体系)ddH2O 37.5ul ×? 10mM dNTP 1ul ×? 聚3箱式冷热冲击实验机合酶链式反应(PCR)详细步骤
1、准备工作电钢丝绒耐摩擦实验机池针刺实验机
1、实验用具与材料:
(1)移液枪:200ul、10ul
(2)吸头:200ul、2混双柱拉力实验机凝土排水管内水压实验机鞋底止滑实验机0ul
(3)吸冲洗腐蚀实验机头台:放置200ul和20ul的吸头1个
(4)EP管1.5ml、100ul
2、实验用具的处理与准mwd10a电子式箱包轮子耐磨实验机人造板万能实验机备
塑料制品:(包括吸头、EP管等)
送至高压3次y52缓冲材料冲击实验机,实验前将枪头放入吸头台。
3、试剂配制和准备:
(1) 双蒸水: 100ml盐水瓶内装高温高频疲劳实验机40ml蒸馏水,送至高压,后分装到几个1。5mlEP管中,⑵0℃中保存备用。
(2) PCR中所轴承磨擦磨损实验机需要的各种试剂
3、PCR时注意事项:
佩戴1次性手套,同时避免戴上的1钢管脚手架扣件实验机次性的手套接触可疑污染物。
4、PCR步骤
1、准备100ul EP管
2、顺次fzg齿轮实验机在管中加入:(50ul反应体系)
ddH2O 37.5ul ×?
10mM dNTP 1ul 材料熔点高温测试仪/实验机×?
10×PCR buffer 5ul ×?
螺栓扭矩实验机25mM MgCl2
(加上前要摇匀) 3ul ×?
上游引物 1ul高低温实验机 ×门窗角强度实验机;?
下游引物 1ul ×?
模板cDNA 1ul
3、稍离心
4、100℃沸水皮带轮静扭矩实验办公椅扶手实验机机浴1分钟
5、趁热加入Tag酶0.5ul(冰上操作)
6、再鞋曲折实验机加入50钢筋曲折实验机ul液体石蜡封闭
7、10000rmp离心1分钟
8、PCR条件
94℃ 1min
58℃ 50sec
72℃ 1min30金属材料拉伸实验机sec
进行40个循环,然后72℃ 10min 完后4℃保温。
9、10000rmp离心5min
10、将下层水相转入新的0.65mlEP管中,-20℃保存
聚合酶链式反应(PCR)详细步骤
聚合酶链式反应(PCR)详细步骤
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